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ProPac WCX-10色谱柱如何延长寿命,降低检测成本?
更新时间:2018-04-28   点击次数:3184次

生物制药行业的小伙伴们,如果您正在做蛋白电荷异构体的分析,80%-90%的人手头上都有一款ProPac WCX-10的经典色谱柱,每次拜访客户,大家都说这柱子价格贵啊!有没有妙招来延长这款柱子的寿命,降低检测成本。 我们倾听大家的心声,这里给出一些小窍门和注意事项,帮您节省时间成本和经济成本!

 

有图有真相,首先我们先剖析一下这跟柱子填料的结构

 

经过庖丁解牛,我们知道了这根柱子的结构,那么第二步要学会看QAR( N细胞色素C>2250, 1.0<As<1.7, P<1760)并重复COA条件做个入库检验。符合出厂标准再使用。

 

三是重点的,掏心窝的话了,仔细阅读柱子的快速操作手册

 

 

第四步就是我们重点中的重点了,色谱柱的清洗方法

1.对于轻度污染,使用1-2M高盐溶液在分析完成后进行清洗就可以了。

2.对于比较严重的污染,进样100-500uL或者更多进样体积的0.1-1M NaOH进行清洗。(在进行此步操作时,请在缓冲液A体系下进行,完成进样NaOH后,进样缓冲液A 500ul)

3.使用NaOH过柱子清洗。

.配置20 mmol/L MES(pH6.5)的缓冲液(使用NaOH调节pH到6.5,,并对流动相超声脱气)。

.使用20 mmol/L NaOH为流动相,以0.5 mL/min的流速在室温下,冲洗柱子15分钟。

.使用20 mmol/L MES(pH6.5)的缓冲液,以 1mL/min的流速平衡柱子1小时。

4.20 mmol/L MES(pH6.5)的缓冲液高温处理。

.以0.2 mL/min或者0.5 mL/min的流速在50度下平衡柱子48小时。

.以0.5 mL/min的流速在80度下平衡柱子8小时。

5.如果有保护柱,请将保护柱和分析柱分开独立清洗。

6.如果上述清洗方法无效,且有柱压上升的现象,可以将柱子反接在系统上清洗,但是不要超过该柱子能耐受的大压力值。

 

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