HPLC Conditions :
色谱柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×250 mm
流动相:A:20 mmol/L 乙酸铵+2 mmol/L甲酸 B:甲醇
B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)
流速:1.0 mL / min
温度:35 °C
检测:PDA 230 nm
浓度:40 mg/mL
进样量:10 µL
样品:饮料样品:以水为稀释剂稀释至40 mg/mL;
糕点样品:称取样品400 mg于10 mL容量瓶中,加5 mL水超声20 min,冷却后加入400 µL 92 g/L的亚铁和400 µL 183 g/L的乙酸锌溶液,加水定容超声5 min,离心,过滤。
使用4.6x150 mm规格色谱柱进行分析
为了缩短分析时间,我们也尝试使用GB5009.28-2016方法以及上面提到的国标原流动相基础上加甲酸的方法,使用4.6x150 mm规格的SUPERIOREX ODS色谱柱,对安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸混合标准品进行分析。如下面结果所示,使用150 mm柱长的色谱柱,可以缩短分析的时间。
HPLC Conditions :
色谱柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm
流动相:20 mmol/L 乙酸铵:甲醇=95:5
流速:1.0 mL / min
温度:35 °C
检测:PDA 230 nm
浓度:安赛蜜、糖精钠、苯甲酸各约0.1mg/mL;山梨酸、脱氢乙酸各约0.067 mg/mL
进样量:10 µL
HPLC Conditions :
色谱柱:SUPERIOREX ODS S5; 4.6 mm i.d.×150 mm
流动相:A:20 mmol/L 乙酸铵+2 mmol/L甲酸 B:甲醇
B(%)5%(0min)→5%(5min)→40%(15min)→40%(20min)→5%(20.1min) →5%(35min)
流速:1.0 mL / min
温度:35 °C
检测:PDA 230 nm
浓度:各约0.1 mg/mL
进样量:10 µL
总结
综上所述,按照GB5009.28-2016食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定项下方法,无论使用柱长150 mm还是250 mm的SUPERIOREX ODS色谱柱,均可得到安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠以及脱氢乙酸五种食品添加剂混合标准品的基线分离结果。
流动相中加酸的梯度条件可明显改善色谱峰形及分离,但苯甲酸、山梨酸保留会变强,五种物质出峰顺序较国标原方法会有所变化。若想进一步改善糖精钠、苯甲酸之间的分离度,可适当延长初始有机相运行时间。
本次所选的饮料样品中不含本次检测的五种食品添加剂;糕点样品中检出山梨酸、脱氢乙酸。使用250 mm柱长的SUPERIOREX ODS色谱柱可得到两种样品的良好分析结果。
由于食品样品多种多样,本次只选择两种样品,很难说具有广泛代表性,客户可根据自己的样品情况对分析条件进行进一步优化。